◎ Coating-free CD MSC Medium(RS001-20)은 RS001-10과 어떻게 다른가요?



두 제품 모두 Chemically Defined 무혈청 배지라는 점은 동일하지만, 
RS001-20은 배양 용기에 별도의 코팅(예: fibronectin, vitronectin 등 매트릭스 코팅) 처리를 하지 않고도 MSC 부착 및 증식이 가능하도록 설계된 Coating-free 제품입니다. 

코팅 공정 생략을 통해 작업 편의성과 공정 시간을 줄이고자 하는 경우 RS001-20을, 
특정 매트릭스 코팅을 이미 사용 중이거나 코팅 조건을 직접 최적화하고자 하는 경우 RS001-10을 고려하실 수 있습니다

◎ CD MSC Medium(RS001-10)은 XF-MSC Medium과 어떻게 다른가요?


XF-MSC Medium(RS001-03)은 동물성 성분을 배제한 제품이며, 

CD MSC Medium(RS001-10)은 여기서 한 단계 더 나아가 배지 내 모든 성분의 화학적 조성이 명확히 정의(Chemically Defined)된 무혈청 배지입니다. 
로트 간 편차를 최소화하고 재현성이 특히 중요한 연구•공정 개발 단계에 적합합니다.

◎ XF-MSC Medium(RS001-03)은 어떤 경우에 사용하는 것이 좋나요?


XF-MSC Medium은 동물유래 성분을 배제한 Xeno-free 제품으로, 
임상 적용을 염두에 둔 세포치료제 개발이나 이종 성분에 대한 면역반응 우려가 있는 연구에 적합합니다. 

다만 일반 혈청 함유 배지와 세포 증식 패턴이 다를 수 있으므로, 기존 배지에서 전환 시 초기 계대에서 세포 반응을 모니터링하는 것이 좋습니다.


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◎ RS001-01(FBS 포함)과 RS001-02(FBS 미포함) 중 어떤 것을 선택해야 하나요?


RS001-01은 2% FBS가 이미 포함되어 있어 즉시 사용이 가능하며, 표준 실험 조건에 적합합니다. 

RS001-02는 FBS가 포함되어 있지 않아, 사용자가 원하는 로트의 FBS를 직접 첨가해 사용할 수 있어 FBS 로트 관리가 필요한 실험이나 자체 QC 기준이 있는 기관에 적합합니다.

Welgene은 혈청 함량과 조성에 따라 5가지 MSC 배지를 제공합니다. 

● LS-MSC Medium(RS001-01)은 2% FBS를 함유한 Low-serum 배지

● LS-MSC Medium(RS001-02)은 FBS를 첨가하지 않은 Low-serum 배지(FBS를 직접 첨가하여 사용)

● XF-MSC Medium(RS001-03)은 동물성 성분을 배제한 Xeno-free 배지

● CD MSC Medium(RS001-10)은 성분이 모두 정의된 Chemically Defined(무혈청) 배지

● CD MSC Medium Coating-free(RS001-20)는 별도의 코팅 없이도 사용 가능한 Chemically Defined 배지


용도(연구용/전임상/GMP 공정 등)와 임상 적용 목적에 따라 적합한 제품을 선택하시면 됩니다.


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● 고체 상태에서 물에 불용이므로 유기 용제에 녹여 사용하여야 하고, 나노입자 제조 시 사전 용해 및 필터링 필수임. 



잘 용해시키는 용제는 Chloroform, Ethanol, Methanol 등에 잘 녹음. 



수용액 제조시 직접 물에 녹지 않으므로 thin-film hydration 방식 또는 유기용매에서 건조 후 수화 방식 필요함. 



LNP 제조시 일반적으로 다른 지질들과 혼합 후 에탄올에 녹여 사용함 (microfluidic 방식 등).

● mRNA 백신 및 치료제



● 유전자 치료제



● 단백질 발현 기반 치료제



● 세포치료제 보조



● 화장품 및 피부 투과 제형 등

● LNP의 내구성ㆍ안정성ㆍ구조적 견고성 강화



● 이온화성 지질과 함께 이중막 구조 형성



● 혈중 안정성 및 입자 균일성 향상



● 다양한 전달 플랫폼(mRNA백신, 유전자치료제, siRNA 의약품)에서 표준처럼 사용되는 핵심 지질

◎ hMSC, iPSC, ESC 등 세포 종류별로 media 선택 기준은 무엇인가?


● 종류와 목적에 따라 필요한 배지의 성분과 기능이 달라지므로, 각 줄기세포의 특성에 맞는 배지를 선택하는 것이 중요

Trypsin 처리시 Ca²⁺/Mg²⁺가 있는 제품을 사용하는 경우는 어떤 실험인가요?





● Trypsin은 췌장에서 분비되는 효소로, 소장에서 펩신과 함께 단백질 소화를 돕는 주요 단백질 분해 효소이며, peptide 서열에서 lysine 또는 arginine 아미노산 뒤를 가수분해하는 특징을 가지고 있음.

    또한, 세포 배양에서는 0.025%에서 0.5%의 농도로 사용되며, 세포 표면의 단백질을 분해하여 부착된 세포가 용기에서 떨어지게 하여 세포 채취를 용이하게 함



- Trypsin에 Ca²⁺/Mg²⁺가 포함된 조성은 세포 분리보다는 세포 기능 유지/특정 분화 연구 목적에 더 가까움



- 특정 primary cell에서 Ca²⁺/Mg²⁺가 없으면 세포 손상이 심하거나 viability가 떨어지는 경우, low activity trypsin과 함께 Ca²⁺/Mg²⁺이 포함된 조성을 사용하기도 함.



- Trypsin 활성이 너무 강하지 않게 완충해 세포가 과도하게 떨어지거나 손상되는 것을 막기 위한 목적도 있음

Starvation 실험 시  glucose는 제거해야 하나요?





1. Serum starvation

가장 흔히 쓰이는 방법으로 FBS만 제거하고, 기본 배지 성분(Glucose, Amino acids, Vitamins)은 그대로 유지

혈청 내 성장인자(EGF, IGF, FGF 등) 자극을 차단하는 목적으로 세포를 동기화(G0/G1 정지)하여 특정 자극 후 반응을 보도록 준비하는 과정

       → 이 경우 glucose는 제거하지 않음



2. Nutrient starvation

세포의 특정 대사 경로를 연구할 때는 Glucose를 포함한 특정 영양소를 제거하기도 함

      - Glucose starvation: 세포의 glycolysis, AMPK/mTOR 반응, autophagy 활성 관찰

      - Amino acid starvation: 특히 glutamine, leucine 결핍 → mTORC1 신호 연구에 활용

      - Serum + glucose double starvation: 극단적 스트레스 모델 (예: apoptosis, autophagy 촉진 연구)



● 주의사항

Glucose를 완전히 제거하면 세포가 빠르게 죽거나 stress가 과도할 수 있음. 즉, 일반적인 cell line은 몇 시간 내 viability가 급격히 떨어짐

그래서 보통 단시간(2–6시간 정도) 처리하거나, 저농도 glucose (예: 0.5–1 g/L) 조건으로 부분 starvation을 함

목적에 따라 time-course 최적화 필요

Poloxamer 188 - 독성 또는 세포 스트레스 완화 외 효과는? 





● 세포 보호 효과 (Shear protection)

    → 세포배양(특히 부유세포, suspension culture)에서 교반·기포 발생으로 인한 mechanical shear stress가 세포막을 손상시킬 수 있음. 

        Poloxamer 188은 계면활성제로서 세포막에 흡착해 막 안정화(membrane stabilization) 역할을 하고, 기포 표면장력을 낮춰 세포 손상과 사멸을 줄여줌.

        따라서 CHO, HEK293, Hybridoma 등 단백질/항체 생산 세포주에서 흔히 사용됨



● 세포막 sealing 효과

     → 세포 손상 시 생기는 plasma membrane lesion에 흡착해 빠른 sealing을 유도

     → 외상/허혈 모델에서 세포 보호제(cytoprotective agent)로 연구됨

     → 줄기세포·근육세포 연구에서 세포막 안정화제로 자주 인용됨



● 배양액 안정화

     → 기포 억제(antifoaming) 효과로, 대규모 바이오리액터에서 배양액 안정성 제고

     → 단백질이 계면에서 변성되는 것을 억제하여 단백질/항체 생산 수율 향상



● 의약품 제형에서의 역할

     → 주사제/단백질 제제에서 solubilizer & stabilizer로 사용

     → 단백질 응집·변성을 억제, 약물 용해도 향상

     → FDA에서도 비독성 보조제로 인정, 상용화된 제형 다수 존재



● 기타 연구효과

     → 허혈-재관류 손상 모델에서 심근세포 보호

     → 근이영양증, 세포막 결손 질환 등에서 치료 후보로 연구



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Poly-D-Lysine - 세포 생존에 영향을 주지는 않나요?





● 긍정적 효과

      - 접착력이 약한 세포에서 생존율 제고

      - 뉴런, iPSC-derived neuron, primary hippocampal neuron 등은 PDL 코팅이 없으면 쉽게 apoptosis 발생

      - 부착 안정화는 downstream 실험(분화, 시그널링, 전기생리학 분석 등) 재현성에 필수적



● 잠재적 부정 효과

      - 고농도 사용 시 세포막에 비특이적 결합을 하여 세포 스트레스/독성 유발 가능

      - 코팅 후 세척 불충분 시, 표면에 남은 잔여 PDL이 세포 viability에 영향을 줄 수 있음



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● Ca²⁺/Mg²⁺는 cadherin·integrin 같은 접착 단백질의 활성 유지에 필요한데, 이온이 있으면 세포-세포/세포-기질 접착이 강해져 해리가 어려움

     그래서 trypsin 같은 효소는 보통 Ca²⁺/Mg²⁺가 없는 HBSS에 녹여 사용 

    → 따라서 Ca²⁺/Mg²⁺ free HBSS는 세포 접착을 약화시켜 효소 작용을 도와 세포 해리가 더 잘 일어남



● 해리 후 세포를 다시 ECM(Extracellular Matrix)에 붙이거나 기능을 유지할 때는 Ca²⁺/Mg²⁺가 포함된 HBSS를 사용

     해리 과정 → Ca²⁺/Mg²⁺ free HBSS, 해리 후 세포 안정화 → Ca²⁺/Mg²⁺ containing HBSS



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