세포 배양 오염의 원인과 대책

 

세포 배양에 있어서의 오염 (Contamination) 현상은 세포 배양 실험실에서 발생하는 가장 일반적인 문제이며 때로는 매우 심각한 결과를 초래합니다. 오염은 크게 배지 혈청 및 수중의 불순물, 독소, 가소제 및 세제 등의 화학적 오염물질과 세균, 곰팡이, 효모, 바이러스, 마이코플라즈마, 및 다른 세포주에 의한 교차 오염 등 생물학적 오염의 2가지 범주로 나눌 수 있습니다. 오염을 완전히 제거하는 것은 불가능하지만, 무엇보다 중요한 점은 오염원을 완전히 이해하고 오염이 되지 않도록 무균 조작 및 무균 상태 유지에 주의를 기울이는 것입니다.

 

 

 

 

 

■ 오염의 종류

 

 

 

 

 

 

 

■ 오염원의 종류

오염된 실험용기, 오염된 배양 배지, 오염된 세포주 (Cell line), 잘못된 실험 방법, 인큐베이터 및 부품, 공기 중 오염물질, 실험실 환경 및 실험도구, 실험자 등

 

 

 

■ 안전한 세포배양을 위해 선행해야 할 조건

     1. CO2 인큐베이터를 먼저 소독제로 청소하고 멸균용액과 70% 알코올로 소독합니다 (단, 염소가 함유된 소독제 및 세척제는 피해주세요).

     2. 주기적으로 워터팬에 있는 물을 교체해 줍니다 (멸균수 추천).

     3. Autoclaves water는 워터팬에 넣기 전 식혀 줍니다.

     4. 인큐베이터의 필터는 주가적으로 교체합니다.

     5. 인큐베이터의 문을 오랫동안 열어두지 않습니다.

     6. 인큐베이터 문이 열린 상태에서 작업자가 말하거나 기침을 하지 않도록 합니다.

     7. 항상 글러브를 착용합니다 (70% 알코올로 시험 전 소독하여 진행).

     8. 실험실의 깨끗한 공기 환경을 위해 식음료 반입 금지 및 금연 합니다.

     9. 항상 깨끗한 실험복을 착용합니다.

     10. 생물안전작업대를 사용하기 전에 작업대 표면을 청소합니다.

     11. 생물안전작업대에 작업하기 위한 물품은 알코올로 소독하여 사용합니다.

     12. 생물안전작업대 내의 적절한 기구 배치로 오염의 위험성을 줄입니다.

     13. 오염된 곳에 실험 용기 및 실험 도구를 두지 않습니다.

     14. Water bath의 오염은 빈번히 일어나므로 오염에 주의하여 관리 및 사용합니다.

     15. 뚜껑 및 관련 시험 도구는 화염멸균하여 적절히 사용합니다.

     16. 적절한 항생제를 이용하여 시험에서 발생할 수 있는 오염을 방지 합니다. 

 

 

 

■ 오염원 제거에 활용 가능한 항생제 및 항진균제 (Antibiotics & Antimycotics)

 

 

 

 

■ WELGENE의 Antibiotics and Antimycotics