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Balanced Salt Solution의 종류와 역할

웰진

2025-04-04 (17:35)
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Balanced Salt Solutions

생리식염 완충액 (Buffered Saline, BS)은 체내와 유사한 삼투압 균형을 가지며 pH 완충작용을 하는 용액으로 체내의 pH인 중성에서 가장 효과적인 인산기를 사용한 생리식염 인산 완충액으로 PBS (Phosphate-Buffered Saline), D-PBS (Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline), EBSS (Earle’s Balanced Salt Solution), 그리고 HBSS (Hanks’ Balanced Salt Solution) 등이 널리 사용되고 있습니다.

이 중 PBS와 D-PBS는 가장 기본적인 무기염류만을 포함하며, EBSS와 HBSS는 PBS에 몇 종의 추가적인 무기염료들과 완충작용을 할 수 있는 Sodium bicarbonate 및 D-glucose가 포함되어 있습니다.

이러한 생리식염 완충액들의 기능은 세포 배양 시 세포의 성장을 촉진하기 보다는 살아있는 상태로 유지시켜주는 역할을 하는데, 주 용도는 다음과 같습니다.

(1) 세포배양에 사용될 물질의 용해 또는 희석

(2) 기본적 세포대사에 필수적인 무기이온 들을 제공

(3) 삼투압 평형을 유지

(4) pH를 유지하는 완충액

(5) 배지에서 혈청성분이나 trypsin 등의 특정 성분을 제거하는 세척 등의 목적

PBS와 D-PBS

PBS나 D-PBS는 생물학 분야에서 일반적으로 사용됩니다.

둘 다 NaCl과 phosphate 완충액을 포함하며 삼투압 쇼크를 방지하고 살아있는 세포의 수분 균형을 유지하도록 설계되었습니다.

PBS는 단순한 조성으로 일반적으로 사용되는 완충액인 반면, D-PBS는 보다 세포 배양에 알맞게 KCl도 포함하여 세포독성을 낮추고(Na⁺/K⁺-ATPase pump), 사용 용도에 따라 Ca과 Mg의 유무와 D-glucose 및 피루브산의 유무 등 다양한 조성으로 사용되고 있습니다.

EBSS와 HBSS

EBSS 및 HBSS는 각각 Earle’s salt와 Hanks’ salt를 기반으로 조성된 완충액으로 삼투압 및 pH를 유지하는 데 사용되는 등장성 용액입니다. HBSS와 EBSS는 모두 성장 배지 외부에서 세포를 단기적으로 유지하기 위해 D-glucose와 sodium bicarbonate를 포함합니다. EBSS는 HCO3-/CO32- system에 맞도록 고안되어 기체 상태와 액체 상태의 CO2의 평형에 의존하여 CO2 incubator내에서 pH를 유지하는 반면, HBSS는 sodium bicarbonate 수준이 더 낮고 동물세포를 CO2 없이 일반 대기 상태에서 조작할 수 있도록 고안되었습니다.