Antibiotics & Antimycotics
많은 연구자분들이 동물 세포 배양할 때 bacteria, fungi, mycoplasma, yeasts 등의 미생물에 의한 오염은 매우 빈번할 일이며 이에 따른 영향을 걱정하지 않을 수 없습니다.
오염을 방지하기 위해서는 우선 무균조작 및 무균 상태 유지에 주의를 기울이는 것이 가장 중요하지만 현실적으로 이런 조작들은 쉽지만은 않아 차선책으로 항생제와 항진균제 사용을 결정하여야 할 수 있습니다.
- 이런 항생제나 항진균제들은 그 종류에 따라 세포벽 합성, 핵산 대사 및 단백질 합성을 억제 또는 조절하거나 세포막 구조를 방해함으로써 특이적으로 오염 미생물들을 표적화 및 살상하게 됩니다.
- 하지만 이런 항생제나 항진균제들은 배양하고자 하는 세포주에 영향을 주거나 유독할 수 있으므로 신중히 사용하여야 하며, 사용 전에는 먼저 용량 과 세포주 반응 검사를 실시하여 독성이 나타나는 수준을 확인하여 적정 농도를 결정하는 것이 좋습니다.
Geneticin (G418 sulfate)
Geneticin은 G418 sulfate 또는 G418로 알려져 있으며 bacteria, yeast, protozoa, heminths, mammalian cell에 독성을 나타내어 그 사용이 항생제류에서 비교적 특별합니다.
G418은 mammalian cell에도 독성을 나타내므로 일반적인 항생제로 사용되는 것은 아니며 내성인자는 bacteria 유래의 유전자로서 eukaryotic cell에서도 발현될 수 있어 주로 ion agent로 많이 이용됩니다. G418의 일반적인 사용 농도는 0.1 mg/ml - 2 mg/ml의 범위이지만 sensitivity는 세포의 종류, 세포의 성장주기, 배양 배지, 혈청 대체 물질에 따라 달라질 수 있으므로 ion에 필요한 농도는 실험적으로 dose response curve를 작성하여 결정해야 합니다.
Characteristics of Antibiotics and Antimycotics
아래표는 세포배양에 일반적으로 사용되는 항생제의 종류 및 그 사용 농도를 나타낸 것입니다.
* G(+), Gram-positive bacteria; G(-), Gram-netagive bacteria