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혈청의 종류

       *우태혈청(Fetal Bovine Serum, FBS)과 우아혈청(Bovine Calf Serum, BCS)
       조직 및 세포 배양에서 가장 많이 사용되고 있는 혈청은 우태혈청(fetal bovine serum, FBS)과 우아혈청(Bovine calf serum,
       BCS) 두 가지가 있는데, 우아혈청은 대개 16 개월된 송아지에서 혈청을 채취한 것으로 우태혈청에 비해
       항체와 호르몬의 양에 차이가 있다.
       우아혈청은 우태혈청에 비해 단백질의 양이 2배에 달하고 항체 또한 약 100배 정도 많이 함유되어 있다.
       일반적으로 우태혈청을 더 많이 사용하고 있으나, 세포에 따라서는 우아혈청이 우태혈청에서보다 더
       더 좋은 결과를 줄 수도 있다.
       우태혈청(FBS)과 FCS (fetal calf serum)을 혼용하고 있는데 'fetus'는 동물의 태아를 의미하고
       'calf'는 송아지를 의미하므로 FCS 용어의 사용은 잘못된 것이라 할 수 있다.
       *투석우태혈청(dialyzed fetal bovine serum)
        투석우태혈청(dialyzed fetal bovine serum)는 12,000 - 14,000 molecular weight cut-off membrane을 사용하여
        0.15 M NaCl solution으로 투석하며 glucose level이 5 mg/dL 이하로 될때까지 투석한다.
        이 과정은 exhaustive dialysis가 아니기 때문에 amino acid와 같은 low molecular weight dialyzable component가
        모두 제거되는 것은 아니고 또한 침전과 serum peptide 불활성화 또한 없다.
       투석우태혈청은 일반적으로 저분자량의 성분들이 방해를하는 실험에 사용된다.
       이러한 실험에는 HPRT (hypoxanthine-thymidine deficient), DHFR (dihydrofolate reductase),
       GS (glutamine synthetase)와 같은 transfected cell system에 대한 labeling 과정도 포함된다.
       투석은 염, 호르몬, 기타 저분자의 protein을 포함한 많은 성분들의 level을 감소시킨다.
       * 신생우아혈청(newborn calf serum, NCS)
       신생우아혈청(newborn calf serum, NCS)은 생후 10일 이하의 송아지에서 채취한 것으로
       우태혈청과 많은 점에서 유사하며 다만 protein의 함량이 약간 높다.
       혈청은 때로 바이러스 감염의 위험성을 제공하기도 하는데 이러한 위험성을 완전히 제거하기
       위해서 gamma 선 조사 처리된 gamma-irradiated serum을 사용하기도 한다.
       *Iron supplemented bovine calf serum
       Iron supplemented bovine calf serum은 4 - 6 개월된 formula-fed calves로부터 채취된 것이다.
       송아지의 먹이는 사육용이므로 혈청에는 lipid와 lipoprotein의 함량이 많다.
       Formula-fed calves 유래의 혈청은 우태혈청에 비해 약 2배의 protein level을 가지지만,
       세포 배양에 필요한 iron의 함량은 낮다.
       우아 혈청의 transferring 분자를 iron으로 채워준다면 경제적인 면에서 고가의 우태혈청을 대체할 수 있다.
       * Charcoal stripped serum
       Charcoal stripped serum은 혈청내 여러 성분들이 제거되어 있는데 이중에는
       estrogen과 같은 lipid-soluble factor (steroid hormones, thyroid hormones 포함)의
       제거도 포함되어 있다.
       * De-lipidated serum
       De-lipidated serum은 silica로 lipid가 제거된 혈청으로서 cholesterol, triglyceride
       등이 제거되어 있으며 또한 glucocorticoids, retinoic acid 등과 같은 lipid-soluble contaminant들도 제거되어 있다.
       * 사람 혈청(human serum)과 말혈청(horse serum, HS)
       우태혈청과 우아혈청외에도 사람 혈청(human serum)과 말혈청(horse serum, HS)이
       사용되기도 하는데, 사람 혈청은 몇몇 인체세포주 배양에 사용되고 있으나 윤리적인
       문제로 인하여 제조 및 사용상에 문제가 있을 수 있다.
       경우에 따라서는 우아혈청보다 말혈청을 선호하는데, 폐쇄되어 무리짓는 말의
       혈청을 얻을 수 있어서 혈청을 채취할 때마다 그 내용물이 일정하기 때문이다.


Mammalian and Insect cell culture
동물 세포 배양의 역사
세포배양시 필요한 장치
생세포수의 계산
살균용 ethanol의 농도
부착 세포 배양과 부유 세포 배양
세포의 동결 보존
동결 보존된 세포의 배양
세포의 계대배양
세포주(continuous cell lines)
곤충 세포의 배양


Classical Media
Classical Media 종류별 성분 비교
세포 배양 배지의 제조에 사용하는 초순수물
Classical Media 성분
Hanks' salt와 Earle's salt의 차이점
세포 배양 배지에 적용되는 완충 작용
L-Glutamine의 함량이 다른 아미노산보다 높은 이유?
L-Alanyl-L-Glutamine과 L-Glutamine
무균 시험(steriliy test)
내독소 시험(endotoxin test)


Serum-Free and Protein Free Media
Serum-free media와 protein-free media
Serum-free media와 protein-free media의 장점
Serum-free media와 protein-free media의 단점
Serum-free media 또는 protein-free media를 PBMC의 배양
Serum-free hybridoma media 또는 protein-free hybridoma media..
Serum-Free CHO media 또는 protein-free CHO media로의 적응 ..
혈청 대체 물질 (serum replacements)


Supplements
세포 배양에서 혈청의 역할
혈청의 종류
혈청의 성분
혈청의 열불활성화 (heat-inactivation)
혈청의 저장
혈청의 해동 방법
세포 배양시 사용하는 항생제
Geneticin(G418 sulfate)
호르몬(hormone)
Soybean trypsin inhibitor
성장 인자(growth factors)
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