Human MSC Osteogenic Differentiation Kit
Catalog Number: RS001-06
Storage Temperature:
- Osteogenic Basal Medium(RS001-06M): 4°C
- Osteogenic 10x Supplement(RS001-06S): -20°C
제품설명
본 제품은 인간 중간엽줄기세포(Human Mesenchymal Stem Cell, hMSC)를 성숙한 골세포(Osteoblast)로 안정적이고 효과적으로 분화시키기 위해 개발된 골분화 전용 키트입니다.
본 키트는 최적의 영양 성분이 배합된 Basal Medium과 고농축 분화 유도 물질이 포함된 10x Supplement로 구성되어 있습니다. 연구자 개별 제조에 따른 배치(Batch) 간 편차를 최소화하고, 세포외기질의 석회화(Calcification) 및 골분화 표지 유전자 발현을 강력하게 촉진하도록 설계되었습니다.
분화 과정 중 발생할 수 있는 세포 독성을 최소화하고 정교한 미세환경을 제공하여, 골질환 신약 스크리닝, 뼈 조직 재생 연구, 조직공학적 스캐폴드 평가 등 다양한 응용 연구에 신뢰성 높은 골세포 모델을 제공합니다.
보관 및 안정성
Human MSC Osteogenic Differentiation Kit는 최상의 상태를 유지하기 위해 Basal Medium은 4°C 냉장 보관하며, 10x Supplement는 냉동조건 (-20°C)에서 보관해야 합니다.
10x Supplement는 사용 직전 해동하여 사용하시길 권장하며, 특히 제품 성분이 변질되는 것을 방지하기 위해 반복적인 해동과 재동결 과정은 반드시 피해야 합니다. (필요 시 소분하여 보관하는 것을 권장합니다.)
Basal Medium과 10x Supplement를 혼합한 Complete Medium은 2~8°C 냉장 상태에서 차광하여 보관하시고, 최상의 분화 효율을 위해 조제 후 2~3주 이내에 사용하시는 것을 권장합니다.
개봉 후에는 오염 방지를 위해 무균 상태에서 신속히 사용하시는 것을 권장합니다. 제품의 변성은 (1) 침전물 또는 부유물, (2) 용액의 탁해짐, (3) 색의 변화 등으로 나타날 수 있습니다. 각 제품의 유효기간은 제품 라벨에 표시되어 있습니다.
생물학적 특성
Human MSC Osteogenic Differentiation Kit의 생물학적 특성은 골전구세포 및 중간엽줄기세포의 분화 유도율, 세포외기질 내 칼슘 축적 및 석회화 효율, 그리고 대표적인 골분화 표지 유전자(ALP, Runx2, Osteocalcin 등) 발현을 기준으로 엄격하게 평가됩니다.
먼저 분화 유도 후 형성되는 칼슘 침착량 및 미네랄 결절 형성 빈도를 기존 표준 제품들과 비교 분석하여 동등 이상의 성능을 나타내는지 확인합니다.
배양 과정에서는 현미경 관찰, Alizarin Red S 염색 또는 Von Kossa 염색 등을 통해 정교한 미네랄 축적 양상과 형태학적 변화를 지속적으로 모니터링하여 품질의 일관성을 검증합니다.
또한 세포 독성 시험을 통해 배지 성분에 의한 부정적 영향이 없음을 철저히 확인하여, 안심하고 사용할 수 있는 품질을 보장합니다.
사용방법
1. 냉동 보관 중인 10x Supplement를 사용 직전 냉장(2~8°C) 또는 상온에서 완전히 해동합니다.
2. Basal Medium에 해동된 10x Supplement를 9:1 비율(최종 1x 농도)로 혼합하고, FBS는 최종 농도가 10%, Gentamicin은 최종 농도가 5 μg/ml가 되도록 각각 첨가한 후 부드럽게 혼합하여 Complete Medium을 제조합니다.
3. 배양 용기 내 hMSC가 약 70~80% Confluency에 도달하면 기존 배지를 조심스럽게 흡입(Suction)하여 제거합니다.
4. 세포 층을 PBS 등의 세척 완충액으로 가볍게 씻어낸 후, 준비한 Complete Medium을 적정량 첨가합니다.
5. 37°C, 5% CO2 인큐베이터에 용기를 넣어 골분화를 유도합니다.
6. 2~3일마다 신선한 Complete Medium으로 배지를 교체하며, 현미경을 통해 세포 형태 변화 및 석회화 결절(Mineralized nodule) 형성을 모니터링 합니다.
7. 분화 유도 기간(통상 14~21일)이 완료되면 Alizarin Red S 염색, ALP 활성 측정 및 유전자/단백질 분석 등 후속 실험을 진행합니다.
