DMG-PEG 2000
Catalog Number: ACH004-01
Storage Temperature: ≤ –20°C
제품설명
DMG-PEG 2000은 Dimyristoyl Glycerol(DMG, C14 myristoyl chain 2개)에 평균 분자량 2,000 Da의 Methoxypolyethylene Glycol(mPEG)이 결합된 PEG화 지질(PEGylated lipid)입니다. 소수성인 두 개의 미리스토일 사슬이 지질막(또는 지질나노입자 표면)에 고정되는 앵커 역할을 하고, 친수성 PEG사슬이 입자 표면에 입체적 보호층(steric corona)을 형성합니다. 이온화지질, 헬퍼지질, 콜레스테롤과 함께 LNP를 구성하는 4대 지질 성분 중 하나로, mRNA·siRNA·ASO·플라스미드 DNA 등 핵산 치료제의 제형화에 표준적으로 사용됩니다. DSPE-PEG 2000과 같은 장쇄 PEG-지질에 비해 지질 이중층과의 결합력이 상대적으로 약해, 전신 순환 중 비교적 빠르게 입자 표면에서 해리(PEG shedding)되는 특성을 가집니다. 이 때문에 순환 중에는 옵소닌화 및 면역인식을 줄여 입자 안정성을 유지시키면서도, 표적 조직 도달 후에는 세포 섭취 및 엔도솜 탈출을 저해하지 않는 최적의 지질로 널리 채택되고 있습니다.
보관 및 안정성
DMG-PEG 2000의 분자 대부분을 차지하는 PEG 사슬은 폴리에테르 특유의 autoxidation 경향이 있어 장기 보관 시 과산화물·알데하이드 등의 분해산물이 생성될 수 있고, 글리세롤-지방산 및 글리세롤-PEG를 잇는 에스터 결합은 수분에 노출되면 가수분해 될 수 있습니다. 따라서 장기 안정성 유지를 위해 수분 및 산소에 대한 노출을 최소화하고 -20°C 이하에서 보관하는 것을 권장합니다. 개봉 후에는 용기를 밀봉하여 보관하고 반복적인 온도 변화를 최소화하십시오. 분말 상태는 적절한 차광·동결 조건 하에서 보관 시 통상 1년까지 사용 가능합니다.
용해 및 사용 시 주의 사항
고체(분말) 상태에서 물에 불용이므로 Chloroform, Ethanol, Methanol 등의 유기 용제에 용해하여 사용하여야 합니다. 유기용매에 용해한 액상 상태는 산화 및 분해 반응에 취약하므로, 취급 과정에서 산소노출을 최소화하기 위해 질소 또는 아르곤 분위기 하에서 작업하는 것을 권장합니다. 또한 제조 후에는 가급적 즉시 사용하거나 공기와의 접촉을 최소화한 뒤 -20°C 이하(또는 -80°C)에서 단기간 보관하고 반복적인 동결 및 해동을 피해야 합니다. LNP 제형화 후에는 지질 자체의 안정성 뿐만 아니라 입자의 응집 및 누출을 방지하기 위해 2~8°C의 냉장 보관(단기) 또는 적절한 동결보호제(Cryoprotectant)를 포함한 극저온(-80°C)의 조건에서 보관하는 것이 일반적입니다.
주요 응용 분야 및 사용 방법
1) 주요 응용 분야
◈ mRNA 백신 및 치료제용 LNP 제형
◈ siRNA/안티센스 올리고뉴클레오타이드(ASO) 전달 시스템
◈ CRISPR/Cas9 등 유전자 편집 전달체(delivery vehicle) 개발
◈ 종양학 및 희귀질환 영역 핵산치료제 연구
2) mRNA-LNP 조성 예시
◈ 이온화 지질: DSPC:콜레스테롤:DMG-PEG 2000 = 50:10:38.5:1.5(mol%), N/P ratio 약 6 (또는 핵산:지질 중량비 약 0.05)
3) siRNA-LNP 조성 예시, 1mL 당
◈ DLin-MC3-DMA(이온화 지질) 13.0mg
◈ DSPC 3.3mg
◈ 콜레스테롤 6.2mg
◈ DMG-PEG 2000 1.6mg
LNP 제형 기본 프로토콜
1. 4종 지질을 각각 무수 에탄올에 용해한 후 목표 몰 비율에 맞춰 에탄올상 지질 혼합액을 조제합니다.
2. 핵산(mRNA/siRNA)을 25~50 mM Sodium Acetate(pH 4.0~5.0) 등의 약산성 완충액에 희석합니다.
3. 지질혼합액(에탄올)과 핵산 수용액을 약 1:3 비율로 microfluidic 방식 등으로 급속 혼합하여 LNP를 형성합니다.
4. 형성된 LNP를 PBS(pH 7.4) 등으로 투석하여 에탄올 및 유리 핵산을 제거한 뒤 0.2 μm 필터로 멸균 여과 후 냉장 보관합니다.
주의
For In Vitro Use Only
