•       Equipment

 

 

① NanodropONE

 

 

② Pippet

 

 

 

•       Reagents

 

 

① 70% EtOH

 

 

② DNA sample

 

 

③ Blank solution

 

 

 

•       Procedure

 

 

① 장비 뒤쪽의 전원을 켜고, 장비가 준비될 때까지 기다린다.

 

 

② 홈 화면에서 핵산 탭을 누르고, dsDNA 아이콘을 선택한다.

 

 

③ 세척용 티슈에 70% EtOH 용액을 분무기로 분사하고, 두 페디스털을 청소한다.

 

 

④ 2 ㎕  블랭크  용액을 준비하여 하단의 페디스털에 피펫팅하고 암을 내리고 블랭크 버튼을 누른다(블랭크를 누르고 측정이 완료되기를 기다린다).

 

 

⑤ 암을 올리고 세척용 티슈에 70% EtOH 용액을 분무기로 분사하고, 두 페디스털을 청소한다.

 

 

⑥ 2 ㎕  샘플 용액을 준비하여 하단의 페디스털에 피펫팅하고 암을 내리고 샘플 측정 버튼을 누른다(샘플 측정을 누르고 측정이 완료되기를 기다린다).

 

 

⑦ 샘플 측정이 완료되면 스팩트럼과 보고된 값이 표시된다(해당 값을 시험 결과로 기입한다).

 

 

⑧ 세척용 티슈에 70% EtOH 용액을 분무기로 분사하고, 두 페디스털을 청소한다.

 

 

⑨ 샘플 측정이 완료되었으면 실험 종료를 누른다.

 

 

 

[사진 출처 : Thermo Scientific]

 

•     DNA의 순도

 

 

1) DNA의 순도(Purity)는 흡광도 값 중 A260, A280, A230 비율로 결정 된다.

 

 

2) A260/280 비율

 

 

  : 1.8 ~ 2.0(1.9) 순도 좋음

 

 

  : A260/280 비율 낮은 경우, DNA 농도가 낮은 경우와 단백질 오염이 오염이 있는 경우에 나타난다.

 

 

  : A260/280 비율이 높은 경우, DNA 농도가 높은 경우와 RNA 오염 또는 DNA가 물리적 또는 화학적인 요인에 의해 조각나거나 분해되는 경우에 나타난다.

 

 

3) A260/230 비율

 

 

  : 2.0 ~ 2.2 순도 좋음

  

 

  : A260/230 비율 낮은 경우, Cabohydrate, Phenol, Guanidine 등의 오염의 경우 나타난다.