세포 배양 오염의 원인과 대책
세포 배양에 있어서의 오염 (Contamination) 현상은 세포 배양 실험실에서 발생하는 가장 일반적인 문제이며 때로는 매우 심각한 결과를 초래합니다. 오염은 크게 배지 혈청 및 수중의 불순물, 독소, 가소제 및 세제 등의 화학적 오염물질과 세균, 곰팡이, 효모, 바이러스, 마이코플라즈마, 및 다른 세포주에 의한 교차 오염 등 생물학적 오염의 2가지 범주로 나눌 수 있습니다. 오염을 완전히 제거하는 것은 불가능하지만, 무엇보다 중요한 점은 오염원을 완전히 이해하고 오염이 되지 않도록 무균 조작 및 무균 상태 유지에 주의를 기울이는 것입니다.
오염의 종류
오염원의 종류
오염된 실험용기, 오염된 배양 배지, 오염된 세포주 (Cell line), 잘못된 실험 방법, 인큐베이터 및 부품, 공기 중 오염물질, 실험실 환경 및 실험도구, 실험자 등
안전한 세포배양을 위해 선행해야 할 조건
- CO2 인큐베이터를 먼저 소독제로 청소하고 멸균용액과 70% 알코올로 소독합니다 (단, 염소가 함유된 소독제 및 세척제는 피해주세요).
- 주기적으로 워터팬에 있는 물을 교체해 줍니다 (멸균수 추천).
- Autoclaves water는 워터팬에 넣기 전 식혀 줍니다.
- 인큐베이터의 필터는 주가적으로 교체합니다.
- 인큐베이터의 문을 오랫동안 열어두지 않습니다.
- 인큐베이터 문이 열린 상태에서 작업자가 말하거나 기침을 하지 않도록 합니다.
- 항상 글러브를 착용합니다 (70% 알코올로 시험 전 소독하여 진행).
- 실험실의 깨끗한 공기 환경을 위해 식음료 반입 금지 및 금연 합니다.
- 항상 깨끗한 실험복을 착용합니다.
- 생물안전작업대를 사용하기 전에 작업대 표면을 청소합니다.
- 생물안전작업대에 작업하기 위한 물품은 알코올로 소독하여 사용합니다.
- 생물안전작업대 내의 적절한 기구 배치로 오염의 위험성을 줄입니다.
- 오염된 곳에 실험 용기 및 실험 도구를 두지 않습니다.
- Water bath의 오염은 빈번히 일어나므로 오염에 주의하여 관리 및 사용합니다.
- 뚜껑 및 관련 시험 도구는 화염멸균하여 적절히 사용합니다.
- 적절한 항생제를 이용하여 시험에서 발생할 수 있는 오염을 방지 합니다.
오염원 제거에 활용 가능한 항생제 및 항진균제 (Antibiotics & Antimycotics)
WELGENE의 Antibiotics and Antimycotics
