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세포배양시 필요한 장치

도립현미경 (Inverted Microscopy)
세포배양시 항상 세포의 모양을 관찰해야 하므로 현미경은 반드시 필요한 장비이다.배양기 안에서 배양하고 있는 세포를 관찰하기 위하여 광원이 위에 있고,대물렌즈가 아래에 있는 도립현미경을 갖추는 것이 좋고 배율은 40-200배 정도라면 적당하다.


CO2 incubator
동물 세포 배양 기간 동안 배양 배지내 pH는 일정 수준으로 유지되어야 한다. 일반적으로 액상 배지의한 성분인 NaHCO3와 CO2 기체와의 평형에 의해 배지의 pH가 조절된다. 따라서 동물 세포 배양에는CO2 incubator가 필수적이다.세포배양에 사용되는 CO2 incubator의 대부분은 water jacket 형으로서 문의 개폐에 따르는 온도변화가 작고복귀속도도 빠르다.Incubator 내부 가장 아래에는 배지의 습기 증발을 막기 위해서 가습 vat가 있어야 하며늘 멸균수를 채워 넣어 내부 습도를 100%로 유지한다.CO2 incubator는 고온다습하여 잡균의 오염가능성이 크다. 따라서 무균 상태를 유지하도록 주의해야하며자주 청소할 필요가 있다.Incubator의 내부는 1% SDS로 닦고 건조시킨 후 70% ethanol로 다시 한번 닦아낸다.또한 가습용 vat의 물은 멸균수를 사용하고 방부제로 methyl p-hydroxybenzoic acid를 적당한 양으로 첨가하면 좋다.

Clean bench
Clean bench는 무균조작을 위한 작업대이며, HEPA filter 및 송풍기를 사용하여 무균공기를항상 내부로 보낸다.Clean bench 내부에는 형광등과 자외선 살균등이 설치되어 있어야 하며, 사용하지 않을 때에는항상 살균등을 켜놓아야 한다. 사용한 후에는 작업대를 70% ethanol로 닦아야 한다.Clean bench 내에는 세포배양에 필요한 여러장비, 즉, autopipettor, aspirator(배양액을 원심분리한 후 배양상청액을 흡취하는데 사용한다), forceps, micropipetter,burner, pipette (1ml, 5 ml, 10 ml, 25 ml, etc.)등을 둔다. 일반적으로 burner는 pipette과배지 병의 입구등을 화염멸균할 때 사용하지만 무균조작 자체를 신중히 하면 화염멸균이 반드시 필요한 것은 아니다.

초순수 물 제조장치
동물세포의 배양, 특히 무혈청배양에 사용하는 물의 순도는 매우 중요하다.그러므로 동물세포를 실험할 때 사용하는 물을 고도로 정제하는 장치는 필수품이다.JBI에서는 세포배양에 필요한 초순수물(JBI, Cat. No. LS 016-01)을 판매하고 있다.

배양 용기
유리제와 플라스틱제가 있다. 부유세포의 경우에는 유리제와 플라스틱제의 어느 쪽에도 문제가 없으나,접착세포의 경우 유리제에 collagen, poly-D-lysine, fibronectin 등의 접착인자를 coating하는전처리 과정이 필요하다.플라스틱제 배양기는 일반적으로 일회용으로서 세척, 멸균 등의 작업이 필요없다.플라스틱제 배양기는 dish, flask, microwell plate, roller bottle 등의 여러가지 크기와 형상이 있으며각각의 특징을 아래 표에 나타내었다. 

액체 질소 보존통
세포의 장기 보존을 위해서는 액체 질소 보존통이 필수품이다.액체 질소 보존법에는 액체 질소 용액 내 보존(-196°C)과 액체 질소 증기 내 보존(-120°C)이 있다.액체질소 용액 내 보존은 액체질소가 동결앰플(ampule) 내에 침투할 경우 바이러스 등의 오염의 원인이 되고,해동시에는 앰플내의 액체질소가 기화하여 폭발할 위험이 있다.이러한 이유로 액체질소 용액 내에 보존을 할 경우 silicone rubber에 packing이 붙어 있는플라스틱제의 cryotube를 사용하든가, 유리앰플에 봉합하여 사용하는 것이 바람직하다.액체 질소 보존법은 거의 반영구적으로 보존이 가능하지만 일년에 한번은 해동하여 배양하고 다시 동결하도록 한다.액체질소는 기화하여 감소하기 때문에 정기적으로 보충할 필요가 있다.